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试剂类

番红-固绿染色试剂盒

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货号:10658-1, 包装:3X100ML,价格:380元

10658
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QQ:1932526095
Email: proandybio@163.com

产品名称:番红-固绿染色试剂盒
英文名称:Safranin-Fast Green Staining Kit
储存条件:RT

番红-固绿染色试剂盒

产品组成:


10658-1

A---番红染液

100ML

B---固绿染液

100ML

C---清洗液

100ML

 

产品简介:

该试剂盒与众多的番红-固绿染色流程不同,使用清洗剂,以增加染色的对比,使得色彩更加明亮。番红 O 是回归式染料,需要脱色,并用苦味酸或盐酸分化。番红O染色后,可用固绿复染,固绿是渐进式染料。在此浓度下,固绿染色只需要 10~15sec,在正式实验之前,应先完成 1~2 次预实验。

在植物组织的染色方法中,染色体,细胞核、木质、栓化,或角化细胞壁上,用番红O染色,均表现为明亮的红色。在细胞质和纤维素细胞壁上,固绿呈现出绿色。在碱性溶液中,固绿变为蓝色。在水生植物的茎和叶中,以及大多数裸子植物中,染为蓝色至蓝绿色。

 

注意事项:

1 如果待测样本易于滑落,可用多聚赖氨酸或其他粘附剂进行包被。

2 需自备苦味酸溶液

3 固绿复染需要做预实验,摸索染色时间及染色强度。如果染色过强,可稀释固绿染液。

4 由于固绿染液易于蒸发,应在使用后,立即盖紧瓶盖。

5 为节约试剂,可将染液或清洗液,滴加于载片上,使其覆盖样本即可。因为番红染色时间过长,不易使用此方法。

6 第一次使用本试剂盒时建议先取 1~2 个样品做预实验。

 

 

实验操作:

1 试剂准备

1.1 含苦味酸的乙醇:将 0.5g 苦味酸加入 100ml 95%乙醇中;

1.2 含氢氧化铵的乙醇:将 4 滴氢氧化铵加入 100ml 95%乙醇中;

1.3 含无水乙醇的二甲苯:将 2~3 滴无水乙醇加入 100ml 二甲苯中;

1.4 旧清洗液:2 体积使用过的清洗液,1 体积无水乙醇;1 体积二甲苯。

 

2 二甲苯脱蜡,梯度乙醇水化;

 

3 在番红 O 中染色 2~24h;

4 用蒸馏水洗去多余的染料。也可使用流动的蒸馏水,但注意不要把样本冲走;

5 在含有苦味酸的乙醇中脱水 10sec。苦味酸可使番红 O 分化;

6 在含氢氧化铵的乙醇中漂洗载片 10sec~1min,终止苦味酸的反应。过量的乙醇会完全去除番红 O 的染色;

7 在无水乙醇中短暂的蘸一下(10sec),完成脱水;

8 在固绿染液中复染 10~15sec;

9 用旧清洗液洗涤多余的固绿染液;

10 在清洗液中洗涤载片,蘸 5~10sec;

11 在含无水乙醇的二甲苯中,蘸一下,去除清洗液,同时去除残留的水;

12 二甲苯透明两次;

13 将载片暂时保存于二甲苯溶液中,直至在载片上加入盖片。在加上盖片之前,不要使其干燥,因为将会导致组织损伤。

 

染色结果: 染色体,细胞核、木质、栓化,或角化细胞壁染为红色;细胞质和纤维素细胞壁染为绿色。

 

保存条件: 室温避光保存,一年内有效。