货号:10636-1, 包装:100ML,价格:500元
货号:10636-2, 包装:500ML,价格:2000元
英文名称:Plant Tissue Optical Clearing Reagent
植物组织透明化试剂
产品简介:
本司研发生产的植物组织透明化试剂(Plant Tissue Optical Clearing Reagent),是一种可以使固定的植物组织光学透明,并能 快速有效地降低组织中的叶绿素等常见色素自发荧光,在获得植物深层组织高分辨率图像的同时也能很好地保持荧光蛋白 (Fluorescent proteins, FPs)稳定性的透明化试剂。本产品可以实现植物器官如根和叶等组织甚至整个植物体的透明化,并可以 用于三维成像,广泛用于植物学领域的研究。本产品不太适合用于高度木质化的植物样品。
植物的器官和组织中含有多种自发荧光化合物如叶绿素等,在荧光成像中产生非特异性的背景荧光,影响观察效果。此外,植 物组织通常具有不同折射率的结构,引起光散射和球面像差,导致不透明,使得植物组织的深层组织成像变得非常困难。本产品不仅可以有效去除植物组织的叶绿素等常见色素,并调节植物组织的折射率,使其与溶剂折射率相匹配,尽量减少植物组织中的 散射光,改善光学成像效果。
本产品处理的植物样品透明度高。本产品具有很强的去除叶绿素等的能力,可有效降低组织中叶绿素等的自发荧光,调节植物组 织和器官中的折射率,使其与溶液的折射率相匹配,以增加植物组织透光率,能有效实现植物组织和器官等的高透明度。本产品 和Fujifilm/Wako的植物透明化试剂ClearSee™的透明化效果基本一致,和Thermo的Image-iT™ Plant Clearing and Mounting Reagents for Imaging的使用效果相近。
本产品适用范围广。本产品广泛适用于不同物种的整株植物、组织和器官的透明化;也适用于带有荧光蛋白(Fluorescent protein, FP)标记的转基因植物;此外,本产品与多种化学染料兼容,可按需结合使用对植物样品进行透明化和后续的染色及深度成像。
本产品安全性高,且不影响荧光蛋白。本产品为无毒害产品,不含水合氯醛等传统的毒性较大的透明试剂成分,可以保持植物组 织的完整性和荧光蛋白的荧光,使用更加安全
注意事项:
1---本产品储藏或运输中处于较低的温度时会有固体析出,可置于37ºC水浴或37ºC恒温箱中至溶液澄清透明后使用,不影响使用效果。
2---本产品的透明化处理时间较长,对于无特殊要求的植物材料或染色剂,建议先透明化处理后再染色。
3---本产品也可以用于荧光染色后的植物组织的透明,不影响荧光效果,但需要注意避光,减少荧光淬灭。
4--- 经过透明化处理后较嫩的植物组织会变软,请使用平头镊子小心取样,避免损伤植物组织。
5---本产品的实际用量以完全浸没植物材料为准,可根据需要处理样品的大小自行调整。
6--- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7---为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 固定样品。
采集植物样本,将植物材料用纯水洗涤1-2次,用固定液4ºC固定30-120分钟(例如幼苗30分钟,叶片和根120分钟,雌蕊60分钟)。 注:如有必要,在固定时可以进行适度的抽真空以促进固定液的渗透。
2. 洗涤样品。
取出固定的样本,尽量沥去残留液体,用洗涤液(例如PBS)在摇床上缓慢摆动洗涤2次,每次至少洗涤1分钟,以完全去 除固定液。
3. 透明化样品。
a. 取出样本,尽量沥去残留液体,将其浸没在植物组织透明化试剂中,在室温或37ºC进行透明化处理4天至4周(例如叶片和根4 天,幼苗7天,雌蕊2周,成熟组织4周)。具体的透明化时间需根据样品的实际情况适当调整。
b. 透明化处理期间可观察到植物组织透明化试剂由无色变成绿色,则需更换植物组织透明化试剂,直至观察到植物样品呈透明状 为止,经透明化处理的样品可在透明化试剂中室温保存至少3个月。 注:在如有必要,可以在透明化处理时进行适度的抽真空,以确保样本完全浸没在植物组织透明化试剂中,缩短透明化处理的 时间。
4. 常规或荧光染色和观察(选做)。
a. 染色:将染料溶于植物组织透明化试剂,加入并浸没透明化处理后的样品,常温染色30-60分钟,如果是荧光染料则须避光染 色。
注1:普通染料和荧光染料可以根据实验需求或参考适当的文献,将染料溶于水或适当的溶剂中配制合适的工作浓度的染色液, 也可以将染料溶于植物组织透明化试剂中进行染色。
注2:染色时间可根据样品的不同,染料的特性等,同时参考相关文献进行适当调整。 注3:本产品并非能够兼容所有的染料,对于特定的染料需要进行适当的实验进行摸索。 注4:常规染色可以先染色再进行透明化处理,也可以先透明化处理再进行染色,具体需要根据透明化处理是否会减弱甚至影 响常规染色而定;荧光染料由于存在荧光容易淬灭的问题,且一般透明化处理的时间较长,故建议先透明化处理再进行荧光染 色,以尽量避免荧光淬灭。
b. 洗涤:取出染色的样品,用植物组织透明化试剂缓慢摆动洗涤3-4次,共洗涤30-60分钟。
c. 制片:用移液器或滴管吸取植物组织透明化试剂或纯水滴加至载玻片上,用镊子小心取出样品并铺展至理想状态,然后盖上盖 玻片即完成制片。
注:可根据实验需求自行选择合适的封片液。荧光样品推荐抗荧光淬灭封片液。
d. 观察:普通染色的样品可使用光学显微镜即可进行观察和拍照;荧光染色样品或带有荧光蛋白标记的转基因植物样品,可用荧 光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜等进行观察和拍照
保存条件: 室温保存,一年有效。请勿低温保存,否则会有沉淀析出

