货号：10591-1， 包装：50T，价格：680元
英文名称：Low molecular weight Tricine-PAGE rapid gel kit
低分子量Tricine-PAGE快速凝胶试剂盒
10591-1 （50T） | 上层胶溶液 | 50ML | 1瓶 |
彩色上层胶缓冲液 | 50ML | 1瓶 | |
下层胶溶液 | 150ML | 1瓶 | |
下层胶缓冲液 | 150ML | 1瓶 | |
改良型过硫酸铵 | 8ML | 1瓶 |
产品简介：本品适用于2-40KD变性蛋白的Tricine体系电泳。
操作步骤：制胶(以配制一块0.75/1.0 mm厚度的8×10 cm凝胶为例)
1---取等体积 下层胶溶液 和 下层胶缓冲液 ，各2.0/2.7 mL，混匀；
2---向步骤1的混合溶液中加入40/60 μL的 改良型促凝剂 ，混匀；
3---将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中，使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可
(注意：此溶液为过量，请勿全部注入，可留少许于配胶杯中，以判断胶凝固状况)，
无需液封，直接加下层胶溶液即可，也可以根据自己习惯可液封。
4---取等体积 上层胶溶液 和 彩色上层胶缓冲液 ，各0.5/0.75 mL，混匀；
5---向步骤4的混合溶液中加入10/15 μL的 改良型促凝剂 ，混匀；
6---将步骤5的混合溶液注入制胶玻璃板中，插入梳齿；
7---待上层胶凝固后(约10-15 min)，拔去梳齿即可用于电泳。
下层胶配方 | 上层胶配方 | |||||
凝胶厚度 | 下层胶溶液 | 下层胶缓冲液 | 改良型APS | 上层胶溶液 | 上层胶缓冲液 | 改良型APS |
0.75mm | 2.0ML | 2.0ML | 40ul | 0.5ML | 0.5ML | 10ul |
1.00mm | 2.7ML | 2.7ML | 60ul | 0.75ML | 0.75ML | 15ul |
电泳：
1---内槽：1x Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液（Cat:10610-1）。
外槽：1xTris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液 （Cat:10223-1）.
2---将样品与 Tricine蛋白上样缓冲液(变性，还原型，2×)等体积混匀，95℃加热5~10min，加热结束后，高速离心5min，上清即可用于电泳分析.
150v---90min。
注意：电泳结束后，应尽快进行后续步骤，防止多肽扩散出凝胶外。
染胶：
1---因多肽在凝胶中易发生扩散，建议将电泳后的Tricine胶在异丙醇固定液(50%异丙醇，10%乙酸，40%纯水)中固 定30 min后，再进行染色。
2---弃去异丙醇固定液，加入适量 考马斯亮蓝快速染液(免脱色)，以覆盖凝胶为宜，室温下于水平摇床 上染色10~15min。如蛋白量较低，可适当延长染色时间，实际染色时间可根据条带显现程度决定。染色结束后， 弃去染色液，加入纯水洗涤去除残留染液，即可观察结果。
注意事项：
1---本产品制备出的凝胶其上层胶对样品没有浓缩效应，与预制胶类似，但与传统PAGE胶相比，对蛋白条带分离效果更好；
2---不同浓度试剂盒配胶组分请勿混用，否则会影响制胶及电泳效果；
3---改良型促凝剂的使用量仅作参考，实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。加入较多量的促凝剂可加速凝 胶，反之亦然
4---凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下，温度越高，凝胶速度越快，室温过高时建议适当减小改良型 促凝剂的用量；相反，如果室温较低，可适当延长凝胶时间
5---在配胶之前，使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟)，可有效避免凝胶中气泡的形成
6---考马斯亮蓝快速染液(免脱色)含挥发性物质，请注意密封以避免失效
7---为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
8---本产品仅限科研使用
保存温度：
4℃保存，改良型APS,长期不用，建议-20℃保存可以延长保质期。