产品名称：通用型病毒浓缩试剂盒

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英文名称：Universal Virus Concentration Kit

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储存条件：2-8°C

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应用:科研

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通用型病毒浓缩试剂盒

  

产品组成 (50ML)	4X病毒沉淀试剂	50ML	1瓶	可用于150ML
	病毒重悬液	15ML	1瓶
	10X病毒保护试剂	1.5ML	1瓶

注：本产品的小包装（50ML）、中包装(200ML)和大包装(1000ML)分别可以用于150ml、600ml和3L病毒上清液的浓缩。

 

产品简介：

本品通用型病毒浓缩试剂盒(Universal Virus Concentration Kit)，也称通用型病毒沉淀试剂盒(Universal Virus Precipitation Kit)，是一种简单、快速、高效的可以用于多种常见重组病毒浓缩的试剂盒。本试剂盒可用于多种常见病毒的浓缩， 无需超离心或过柱浓缩，病毒回收率最高可达约90%，浓缩后病毒浓度可提高10-100倍，并能有效(但并不充分)地去除通过细胞培养包装获得的病毒上清液中含有的大量血清蛋白、细胞碎片、基因组DNA等。

本产品适用范围广。本试剂盒可用于实验室包装的慢病毒(Lentivirus)、逆转录病毒(Retrovirus)、腺相关病毒(Adeno-associated virus, AAV)、腺病毒(Adenovirus)和杆状病毒(Baculovirus)等病毒颗粒的浓缩，也可以用于其它适当样品中的病毒的浓缩。

本产品使用便捷。只需将病毒沉淀试剂(4X)与含病毒的上清液按照1:3的比例混合，4ºC孵育一段时间后离心，弃上清后用试剂盒 中的病毒重悬液重悬病毒即可。

本产品无需超速离心。无需使用超高速离心机进行长时间离心，普通冷冻离心机3500×g离心0.5-1h即可得到病毒颗粒沉淀。

本产品病毒浓缩效率高。超滤、超速离心法等病毒浓缩法，操作时间长，步骤繁琐，且通常会有细胞碎片和血清蛋白等的污染， 病毒纯度低。使用本产品进行病毒浓缩后，病毒滴度可提高10-100倍，病毒回收率最高可达约90%，病毒损失少，并且病毒在浓 缩过程中能保持病毒生物活性。

 本产品浓缩的病毒保存效果好。本产品提供了病毒保护试剂，可以让浓缩后的病毒有更好的保存效果，保存过程中病毒滴度下降 更为缓慢。

 

保存条件:

-20ºC保存，一年有效。病毒沉淀试剂(4X) 4ºC保存一年有效，病毒重悬液4ºC保存半年有效。

 

注意事项：

1--- 病毒沉淀试剂(4X) -20ºC保存后，融解会有沉淀析出，可以37ºC水浴加热30分钟或以上，完全溶解后使用。

2---浓缩的病毒后续用于培养的细胞或组织感染时，推荐在病毒重悬液中添加病毒保护试剂；如果后续最终考虑用于动物实验，不宜 在病毒重悬液中添加病毒保护试剂。

3---为避免病毒失活，浓缩前的病毒上清液或浓缩后的病毒都应尽量避免反复冻融。

4--- 细胞培养液中的血清对于病毒的沉淀和浓缩有一定的帮助。如果病毒包装用的细胞培养液是无血清或低血清培养液，或者需要从 蛋白含量很低的溶液中浓缩病毒，建议在病毒浓缩时添加无菌的BSA至终浓度为3%，这样会显著提高浓缩效果。

5---本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

6--- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用说明：

1. 使用培养的细胞包装病毒完成后，收集含病毒的上清液。4ºC，3500×g离心10min以充分沉淀细胞碎片，小心吸取上清液用于后 续的浓缩。也可以取含病毒的上清液，使用0.45μm针头滤器(FF365/FF375)过滤以充分沉淀细胞碎片。 注：过滤时，须使用滤膜材质为聚醚砜(polyethersulfone, PES)的针头滤器对病毒上清液进行过滤，其它材质如硝酸纤维素 (nitrocellulose, NC)膜可能对病毒有吸附。

2. 取出4ºC预冷的病毒沉淀试剂(4X)，按照1份病毒沉淀试剂(4X)和3份病毒上清液的比例混合。充分混匀后，在混匀仪或侧摆摇床上 低转速4ºC混匀至少4h或过夜。4ºC孵育充分后通常溶液会变浑浊。更长的孵育时间(如4ºC过夜)，有助于提高病毒回收率，但孵育 时间不宜超过24h。 注1：病毒沉淀试剂(4X)非常粘稠，需缓慢吸取，缓慢加入，并且一定要确保病毒沉淀试剂(4X)和病毒上清液两者充分混匀，才能 确保后续的得率效果。 注2：混匀仪或侧摆摇床上混匀时，需要确保相应转速下溶液能充分混匀。 注3：病毒沉淀过程中须保持4ºC，如果样品体积大，如超过100ml，建议更长的孵育时间。仅在4ºC时，本试剂盒能确保达到最佳 的沉淀效果。温度偏高时，会导致沉淀不充分，而影响得率等。

3. 4ºC，3500×g离心0.5-1h。此时离心管底通常可见白色沉淀(有时沉淀不可见)，小心吸除上清，切勿触及沉淀，不要剧烈晃动离 心管。

4. 4ºC，3500×g离心1min，小心吸净少量的残留液体，切勿触及沉淀。

5. (选做)：配制含有病毒保护试剂的病毒重悬液。每9ml病毒重悬液中加入1ml病毒保护试剂(10X)，混匀。可以根据后续浓缩后病 毒的用途选择是否添加病毒保护试剂。如果后续考虑用于培养的细胞或组织的感染，推荐添加病毒保护试剂；如果后续最终考虑 用于动物实验，不宜添加病毒保护试剂。如果后续用于抽提病毒的DNA或RNA，是否添加病毒保护试剂均可。

6. 加入原病毒上清液体积的1-10%的病毒重悬液(根据后续用途选择是否添加病毒保护试剂)，静置10min，然后使用移液器小心吹打 20-30次，重悬病毒沉淀。吹打时避免产生气泡，剧烈吹打可能导致病毒失活。 注1：如果看不到明显的白色沉淀，就在沉淀可能形成的区域用移液器小心吹打。 注2：白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒颗粒外，还有血清蛋白和少量的细胞碎片和基因组DNA等。

7. 4ºC 12,000×g离心3-5min，吸取上清即为浓缩的病毒。可以根据后续的实验需要，适当分装后-80ºC冻存备用。本步骤的离心沉 淀物中包含血清蛋白和少量的细胞碎片和基因组DNA等。