货号:10507-1, 包装:100ML,价格:180元

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产品名称:SDT裂解液(蛋白提取)
英文名称:SDT Lysis Buffer
英文名称:SDT Lysis Buffer
储存条件:-20°C
SDT裂解液(蛋白提取)
产品简介:
SDT裂解液有很好的全蛋白提取效果,但由于其含有强去垢剂SDS,使蛋白变性失活,因次SDT蛋白提取液不适合用于后续做与活性相关的实验,如免疫共沉淀。
由于本品含有SDS和DTT,因此蛋白浓度测定时不应该选择Bradford法和BCA法,应选择去垢剂和还原剂均兼容的荧光法进行测定。
注意事项:
1---SDT裂解液含SDS,溶解性较差,请37℃水浴完全溶解后使用。
2---根据需要决定是否补充合适的蛋白酶抑制剂。
3---实验前做好自身的防护!
操作步骤:
A---样品处理
1---对于细胞样品:用200ul的SDT裂解液吹打细胞沉淀即可。
通常6孔板每孔细胞或者1ML的菌液加入200ul裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到500-1000ul。
2-对于组织样品:
a---液氮研磨。将100mg样品用液氮研磨成粉后加入500-1000ul的SDT裂解液吹打混匀即可。
b---匀浆器匀浆。将100mg样品切碎加入匀浆器中,并加入500-1000ul的SDT裂解液缓慢匀浆即可。
备注:由于SDT裂解液中含有SDS,因此易产生泡沫,可以先加入500ul的1xPBS进行匀浆,之后再加入1000ul SDT裂解液吹打混匀即可。
B---样品裂解
1---在样品中加入裂解液后,吹打混匀即可。
备注:对于组织样品。加入裂解液后,可以再次低速匀浆处理,以得到更高的裂解效率。
2---沸水浴3min。
3-10000g离心10min,取上清进行后续实验。
保存温度:-20℃,效期2年