货号:10440-1, 包装:100U,价格:180元
货号:10440-2, 包装:500U,价格:700元
货号:10440-3, 包装:1000U,价格:1200元
货号:10440-4, 包装:大包装,价格:询价

产品别名:Sentrin/SUMO-specific protease蛋白酶
英文名称:SUMO Protease,Ulp
SUMO蛋白酶(SUMO Protease,Ulp)
产品简介:
SUMO蛋白酶也称UIP,是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶,它能识别SUMO蛋白的三级结构,而不是氨基酸序列,因此可以高效而且特异性地将SUMO蛋白从重组融合蛋白上切割下来。SUMO蛋白酶在较宽范围的反应环境体系中能保持较高的活性,如温度(4-30℃),PH(5.5-9.5)等,SUMO蛋白酶带有His标签,便于融合蛋白切割后利用亲和层析去除该蛋白酶。
产品性质
中文别名 | SUMO蛋白酶 |
英文别名 | SUMO Protease |
来源 | 大肠杆菌表达 |
标签 | 多聚His标签 |
纯度 | 经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度>90% |
分子量 | 26.55KD |
储存缓冲液 | 25 mM Tris-HCl pH 8.0、0.1%(NP-40)、250 mM NaCl、500μM DTT、50% 甘油 |
酶活性定义 | 30℃,SUMO Protease 1 小时酶切 5 μg 含有酶切位点的融合蛋白, 酶切效率达 85%以上所需的酶量定义为 1 个酶活力单位,即 1U |
运输和保存方法
干冰运输;-80℃保存,有效期1年;避免反复冻融。
使用方法
1.在EP管中配制如下反应体系
组分 | 体积(反应体系可等比例缩减) |
融合蛋白
| 50 μg |
10×Protease Buffer(常规条件下B1)
| 20 μL |
ddH2O
| to 200 μL |
SUMO Protease (1U/μL) | 10 μL
|
Total volume | 200 μL |
2. 30℃孵育,在1、2、4和6小时分别吸出20 μL上述反应液,置于单独的EP管中。
3. 向上述EP管中加入20 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取30 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
【注】如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,延长反应时间,并增加SUMO酶用量,以保证酶切效果。
表1. 不同温度下SUMO蛋白酶切活性
反应时间(h) | 不同温度下剪切活性(%) | |||
4℃ | 16℃ | 25℃ | 30℃ | |
0.5 | 48 | 73 | 83 | 88 |
1 | 60 | 87 | 90 | 93 |
2 | 71 | 94 | 94 | 95 |
3 | 74 | 95 | 95 | 95 |
注意事项
1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2.本产品仅作科研用途!