产品名称：血液直扩PCR试剂盒

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英文名称：Blood Advanced Direct PCR Kit

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储存条件：-20°C

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应用:科研

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血液直接PCR试剂盒

【产品概述】

本试剂盒可以直接对血液样本进行PCR检测，无需进行DNA纯化或样品预处理，避免样本交叉污染问题。可用于直接扩增的血样类型包括：新鲜血液、4℃贮存血液、冷冻血液以及储存在Whatman903和FTA商用卡上的干血渍，且兼容所有常规抗凝剂(EDTA、柠檬酸盐、肝素等)。本产品使用简便，可有效扩增高 GC 含量的模板和引物。

【产品组分】

组分	规格	储存温度
2×Blood Direct PCR Mix	1ml	-20℃
RNase-Free ddH2O	1ml	常温

【使用方法】

注意：以下举例仅供参考，实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定优化反应条件。

PCR反应体系

以20μl反应体系为例

组分	推荐用量	推荐终浓度
2×Blood Direct PCR Mix	10μl	1X
Forward Primer(10μM)	0.5μl	0.2-0.4μM
Reverse Primer (10μM)	0.5μl	0.2-0.4μM
血液模板	1μl
ddH2O	补足至20μl

注：各组分使用前应充分混匀。

1. 模板使用量：建议按1-10 %总体系量取用模板，20 μl体系建议采用1 μl血液作为模板；

2. 引物终浓度：0.2-0.4 μM可以得到较好结果。反应性能较差时，可在0.1-0.5 μM范围内调整引物浓度；

3. 反应体系：推荐使用20 μl，也可根据使用习惯调整体系体积大小；

4. 体系配制：配制好PCR反应体系，置于涡旋仪上涡旋混匀，瞬时离心将反应液集于管底。

PCR 反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	98℃	3min	1 cycle
变性	98℃	15sec	35 cycles
退火	56℃	15sec
延伸	72℃	15sec/Kb
终延伸	72℃	5min	1 cycle

*退火温度：请参考引物的理论Tm值，退火温度可设置低于引物理论值2-5℃，或通过梯度PCR确定最佳温度。

【琼脂糖凝胶电泳】

PCR产物可直接点样跑琼脂糖凝胶（不需添加Loading Buffer）。

【对照反应】

在PCR结果分析时，不管是阳性结果或阴性结果，如果没有对照反应，都不能确定结果是否可靠。为了便于后续实验结果的分析，建议在进行PCR时，设置阳性和阴性PCR对照反应以便于排除假阳性或假阴性的干扰。

【注意事项】

1. 过多的血液模板会抑制PCR扩增反应，在20 μl反应体系中，适宜的模板加入量为1 μl。初次实验时，建议在1-5 μl范围内设置梯度模板加入量，以便找到适宜模板用量。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防护性措施进行实验操作。

3. 本产品仅作科研用途！