货号:10415-1, 包装:100ML,价格:180元
英文名称:Trypan Blue Stain Solution, 0.4%
台盼蓝染色液(0.4%)
产品简介:本品为无菌染色液。
台盼蓝(Trypan blue)又称锥蓝或锥虫蓝等,分子式为C34H24N6Na4O14S4,分子量为960.81,CAS Number 72-57-1,是一种阴离子型染料。Trypan blue不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,即产生所谓的拒染现象,而死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色,是最常用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
台盼蓝染色液(0.4%)常用于检测细胞膜的完整性以及细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量,0.4%为最常用的浓度。
自备材料:
PBS,细胞计数板,显微镜。
操作步骤(仅供参考):
1---收集细胞
如果收集贴壁细胞,应用胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞,收集细胞。如果收集悬浮细胞,则可以直接收集细胞。收集好的细胞在1000-2000g离心1min,弃上清,用1mlPBS重新悬浮细胞沉淀。
2---台盼蓝染色
吸取100ul细胞悬浮液到1.5ml或0.5ml离心管内,加入100ul台盼蓝染色液(0.4%)轻轻混匀,静置染色3min(染色时间可适当延长,但不宜超过10min)。
3---细胞计数
吸取经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数,通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少需要数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数,细胞存活率计算公式如下:
细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)÷细胞胞总数×100%
注意事项:
1-台盼蓝对人体有轻微毒性,请注意实验前自身的防护。
2-注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。
保存温度:2-8℃