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RIPA(强)裂解液(带有抑制剂)

RIPA(强)裂解液(带有抑制剂) 说明书下载


货号:10201-1, 包装:50ML,价格:90元
货号:10201-2, 包装:100ML,价格:150元

10201
Tel:029-88081325
QQ:1932526095
Email: proandybio@163.com

产品名称:RIPA(强)裂解液(带有抑制剂)
产品别名:RIPA(强)裂解液(带有抑制剂)
英文名称:RIPA Lysis Buffer
英文别名:RIPA Lysis Buffer
储存条件:2-8°C

RIPAl裂解液.jpg

RIPA(强)裂解液(带有抑制剂)

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等

试剂盒组分:

RIPA (10201)                         100ML1瓶(2-8℃)
磷酸酶抑制剂(10312)          1ML1支(-20℃)
100mM   PMSF   (10207)        1ML1支(-20℃)

使用说明:

培养细胞样品:
a.融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,或者根据实验需要加入适当的上述蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
b.对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。植物细胞宜在冰上裂解2-10min。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,轻轻vortex或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。轻弹管底以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
对于细菌或酵母:对于1ml菌液或酵母液,离心去上清,如果有必要可以使用PBS洗涤一次,充分去除液体后,轻轻vortex或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入100-200微升裂解液,轻轻vortex或者弹击管底以混匀,冰上裂解2-10min。如果希望获得更好的裂解效果,细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶(Lyticase)消化,然后在使用本裂解液进行裂解。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞或者1ml的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。每100万动物细胞用100微升本产品裂解后获得的上清,其蛋白浓度约为2-4mg/ml,不同细胞有所不同。
c.充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。