货号：10201-1， 包装：50ML，价格：90元
货号：10201-2， 包装：100ML，价格：150元
产品别名：RIPA(强)裂解液(带有抑制剂)
英文名称：RIPA Lysis Buffer
英文别名：RIPA Lysis Buffer
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等
试剂盒组分：
RIPA裂解液（10201） 100ML | 1瓶(2-8℃) |
磷酸酶抑制剂（10312） 1ML | 1支（-20℃） |
100mM PMSF (10207) 1ML | 1支（-20℃） |
使用说明：
培养细胞样品：
a.融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM，或者根据实验需要加入适当的上述蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
b.对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。植物细胞宜在冰上裂解2-10min。
C.对于悬浮细胞：离心收集细胞，轻轻vortex或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。轻弹管底以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
d.对于细菌或酵母：对于1ml菌液或酵母液，离心去上清，如果有必要可以使用PBS洗涤一次，充分去除液体后，轻轻vortex或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入100-200微升裂解液，轻轻vortex或者弹击管底以混匀，冰上裂解2-10min。如果希望获得更好的裂解效果，细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶(Lyticase)消化，然后在使用本裂解液进行裂解。
e.对于组织样品：用组织剪将组织剪成碎片后，按照每 20mg 组织加入 150-250μL 裂解 液的比例加入裂解液，并使用用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。如果用于 ChIP，初步裂 解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟；
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞或者1ml的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。每100万动物细胞用100微升本产品裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为2-4mg/ml，不同细胞有所不同。
f.充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
储存：2-8°C
包装：100ml