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BCA蛋白定量试剂盒

BCA 说明书下载


货号:10136-1, 包装:100ml,价格:300元
货号:10136-2, 包装:500ml,价格:980元

10136
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QQ:1932526095
Email: proandybio@163.com

产品名称:BCA蛋白定量试剂盒
产品别名:BCA
英文名称:BCA Protein Assay Kit
英文别名:BCA
储存条件:RT

BCA 蛋白定量试剂盒

产品简介

          BCA蛋白定量法是利用蛋白质可将 Cu2+还原成 Cu+,而生成的Cu+可与BCA形成紫色络合物的原理来定量检测蛋白含量。该方法快速、稳定、选择性好,不受蛋白种类影响、且在一定浓度范围内受表面活性剂影响小,成为目前应用最广泛的蛋白定量方法之一,可实现对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。本试剂盒标准品采用高质量BSA且可以4保存,使实验更精准便捷。

使用方法

         1. 按下表在酶标板中做蛋白标准品稀释。稀释时,先向每孔加入对应体积二次水,再按照蛋白浓度由低到高的顺序依次加入蛋白标准品溶液,混匀。标准孔稀释好后,再根据需要向空孔中加入原样或稀释后的样品溶液,每孔20μL。建议标准孔和样品孔均做3次平行对照。


1

2

3

4

5

6

7

8

9

二次水 (μL)

20

19.5

19

18

16

12

8

4

0

蛋白标准品 (μL)

0

0.5

1

2

4

8

12

16

20

蛋白含量 (μg)

0

0.5

1.0

2.0

4.0

8.0

12.0

16.0

20.0

          2. 工作液按照BCA试剂 ABCA试剂 B50:1的比例混合,每孔加200 µL,混匀。所需工作液总体积 µL =200 µL×总孔数×1.11.1系数可自行调整,保证每孔有足量工作液加入即可。

          3. 将酶标板放入水浴锅中(不可将酶标板浸于水中),37孵育30 min或目测更合适时间,如样本蛋白浓度过低也可60孵育,孵育时如酶标板盖板冷凝水较多时,可用吸水纸擦去。孵育结束后,用酶标仪或nano drop测定每孔562 nm处的吸光值。

           4. 以每孔蛋白含量为横坐标,标准品每孔吸光度减去空白孔吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,并计算样品孔蛋白含量。计算样品孔蛋白含量时,所用吸光度值应扣去空白孔数值。样品蛋白浓度μg/μL= 标准曲线计算出的样品孔蛋白含量μg÷20 μL,如测定样品经过额外稀释,在计算原样时还应还应乘以稀释倍数。

注意事项:

           1. 蛋白标准品原液为1 μg/μL方便自行设计蛋白标准孔含量梯度。标准孔加入的蛋白标准品原液体积数 (μL) 即为该孔的蛋白绝对含量值 (μg),再用二次水补足体积至20 μL即可。

           2. 本试剂盒每孔最小检测蛋白量为0.5 μg

         3. 确保样品中SDSTriton X-100Tween等表面活性剂含量低于5%EDTA低于10 mM,无EGTADTTβ-巯基乙醇低于1 mM

贮存条件

          BCA试剂 ABCA试剂 B室温保存蛋白标准品4保存

包装规格

          

     BCA试剂盒          A液          B液 1 μg/μL蛋白标准品
         50ML        50ml          1ml           5ml
        100ML        100ml          2ml           10ml
         500ML        500ml         10ml            50ml